生物染色劑的應用范圍涵蓋細胞學、組織學、微生物學等領域，以下是幾種實驗室常用生物染色劑的典型應用：
一、細胞核染色劑
1. 蘇木素（Hematoxylin）
用途：核染色（結合伊紅用于H&E染色）。
原理：與DNA結合，形成藍紫色復合物。
應用：組織切片中細胞核顯色（需媒染劑如明礬）。
2. 吉姆薩染液（Giemsa Stain）
用途：血涂片、瘧原蟲、染色體顯帶。
原理：天青 伊紅復合物結合核酸，區分核與胞質。
特點：顯示細胞核（紫色）、胞質（藍色）及病原體。
3. 結晶紫（Crystal Violet）
用途：革蘭氏染色（初染）、染色體壓片。
原理：穿透細胞壁與核酸結合，革蘭陽性菌保留紫色。
二、細胞質染色劑
1. 伊紅（Eosin）
用途：胞質及膠原纖維染色（H&E中的“E”）。
原理：酸性染料結合堿性蛋白，呈粉紅色。
應用：區分細胞質與核。
2. 亮綠（Light Green）
用途：植物細胞質染色（如與番紅聯用）。
特點：短暫染色后易褪色，需控制時間。
三、特殊結構染色劑
1. 碘液（Lugol's Iodine）
用途：淀粉檢測（藍黑色）、革蘭氏染色媒染劑。
應用：植物細胞淀粉粒顯色，細菌革蘭染色輔助。
2. 番紅O（Safranin O）
用途：革蘭氏染色（復染）、植物木質化細胞壁。
特點：革蘭陰性菌呈紅色，與結晶紫對比鮮明。
3. 蘇丹III/IV（Sudan III/IV）
用途：脂類染色（橙紅色）。
原理：脂溶性染料溶于脂肪顆粒。
應用：脂肪細胞、細胞膜脂滴觀察。
4. 剛果紅（Congo Red）
用途：纖維素染色（藍紅色）、淀粉樣蛋白檢測。
特點：遇酸變藍，用于植物細胞壁區分。
四、微生物專用染色劑
1. 抗酸染色劑（Ziehl Neelsen Stain）
成分：石碳酸品紅（堿性品紅+酚）。
用途：結核桿菌、麻風桿菌（抗酸菌呈紅色）。
2. 墨汁負染（India Ink）
用途：隱球菌莢膜觀察（背景黑色，莢膜透明）。
原理：染料不穿透細胞，凸顯透明結構。
3. 乳酸酚棉藍（Lactophenol Cotton Blue）
用途：真菌菌絲、孢子染色（藍色）。
特點：兼具固定與染色功能。
五、熒光染色劑
1. DAPI（4',6 Diamidino 2 Phenylindole）
用途：DNA特異性熒光標記（藍色熒光）。
應用：活細胞或固定細胞核定位。
2. 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）
用途：死細胞核染色（紅色熒光）。
原理：不能穿透完整細胞膜，標記壞死細胞。
六、對比表格
|
染色劑 |
主要目標 |
顏色 |
典型應用場景 |
|
蘇木素 |
細胞核 |
藍紫色 |
組織切片H&E染色 |
|
伊紅 |
細胞質 |
粉紅色 |
與蘇木素聯用（H&E） |
|
吉姆薩 |
血細胞、病原體 |
紫/藍色 |
瘧原蟲、染色體分析 |
|
結晶紫 |
革蘭陽性菌 |
紫色 |
革蘭氏染色初染步驟 |
|
蘇丹III |
脂類 |
橙紅色 |
脂肪細胞染色 |
|
DAPI |
DNA |
藍色熒光 |
熒光顯微鏡核定位 |
注意事項
1. 毒性：部分染色劑有致癌風險，需戴手套操作。
2. 固定步驟：組織染色前需固定（如甲醛）防止結構破壞。
3. 脫色控制：革蘭染色中乙醇脫色時間影響結果準確性。
