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發布日期:6/27/2025 9:24:00 AM

Tris-鹽酸緩沖液(Tris-HCl緩沖液)是一種廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學研究的緩沖體系,其主要成分是三羥甲基氨基甲烷(Tris)和鹽酸(HCl)。以下是關于Tris-鹽酸緩沖液的詳細介紹:

 

??1. 基本特性??
化學組成??:Tris(分子式C?H??NO?)是一種弱堿(pKa≈8.1),通過與鹽酸反應形成Tris-HCl緩沖體系,有效緩沖范圍為pH 7.0-9.2,最佳范圍在pH 7.5-8.5。
緩沖原理??:Tris通過氨基(-NH?)與HCl形成動態平衡(Tris + H? ? TrisH?),抵抗外界酸堿擾動,維持pH穩定。
??溫度敏感性??:溫度每升高1℃,pH值降低約0.03,需在實驗溫度下調節pH值。

 

??2. 主要應用領域??
??核酸研究??: 
TE緩沖液??(Tris-HCl + EDTA):穩定DNA/RNA,抑制核酸酶活性。
 ??電泳緩沖液??(TAE/TBE):用于DNA瓊脂糖凝膠電泳,TAE適合大片段,TBE適合小片段。

??蛋白質實驗??: 
SDS-PAGE??:1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)作為分離膠緩沖液。
??蛋白質結晶??:低離子強度促進晶體生長。

細胞與酶學??: 
細胞裂解液組分,保護酶活性。
疫苗制備中中和mRNA-脂質納米顆粒。


3. 注意事項
溫度對 pH 的影響:
 Tris 的 pKa 值對溫度敏感:25℃時 pKa≈8.08,4℃時 pKa≈8.4,37℃時 pKa≈7.8。因此,配制緩沖液時需注明溫度(如 “pH 8.0 at 25℃”),實驗中若溫度變化顯著,需重新校準 pH。

離子強度與添加劑的影響:
高濃度鹽(如 NaCl)會降低 Tris 的緩沖能力,需根據實驗需求調整配方;
避免與重金屬離子(如 Cu2?、Zn2?)或強氧化劑混合,防止 Tris 氧化變質。

生物毒性與兼容性:
Tris 對某些細胞(如哺乳動物細胞)有一定毒性,高濃度(>50 mM)可能影響細胞活性,使用時需控制濃度;
 不適合用于含醛類(如甲醛)的體系,因 Tris 可與醛基反應生成 Schiff 堿,影響實驗結果。

 

總之,Tris - 鹽酸緩沖液因緩沖范圍廣、成本低、配制簡便,成為生物實驗中最常用的緩沖體系之一,尤其適用于中性至弱堿性環境下的酶反應、核酸 / 蛋白質操作。使用時需注意溫度對 pH 的影響及生物兼容性問題,根據實驗需求選擇合適的濃度和配方。

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